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【辉骏生物实拍】如何成功裂解细胞注册送28元现金筹码?

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辉骏生物细胞注册送28元现金筹码裂解实验步骤:
1、先准备冰盒,移液器,枪头,细胞裂解液,注册送28元现金筹码酶抑制剂,细胞,废液缸........
 
配置适量裂解液,将各种注册送28元现金筹码酶抑制剂加入裂解液中:注册送28元现金筹码酶抑制剂PSMF,酪氨酸磷酸酶抑制剂Na3VO4,丝氨酸\苏氨酸磷酸酶抑制剂NaF,抑肽酶Aprotinin,亮抑肽酶Leupeptin,胃注册送28元现金筹码酶抑制剂pepstatin。
 
震荡混匀,置冰上,每管细胞加入1ml裂解液,轻轻吹打混匀......加好裂解液后,将装有细胞和裂解液的EP管插入静音混合器上,4℃裂解30min。
 
 
 2、30min后。。。。
将裂解好的细胞注册送28元现金筹码取出,4℃ 12000rpm 离心20min
 
 
3、离心的时候准备Flag磁珠:将磁珠从-20℃ 取出,置冰上溶解后,震荡混匀,取出适量磁珠于1.5ml Ep管中,磁性分离器上分离磁珠,弃液体,用裂解液洗3次,将洗好的磁珠平均分成3分,做好标记。离完心,取出样品置冰上,将上清吸入磁珠中,4℃静音混合器上混匀过夜。
 
 
4、第二天
取出样品,磁性分离器上分离,,弃液体,用裂解液洗涤,再用PBS洗3次(磁性分离器上分离的时候每次要把Ep管盖子上的液体吸干净,若盖子上磁珠较多,可以用离心机甩几秒),磁性分离器上分离,弃PBS,加入3*Flag多肽液,旋转仪上室温洗脱10min。
 
 
5、10min后
取下Ep管,震荡器上震荡约30s,用离心机甩几秒,将磁珠离心的管底,磁性分离器上分离,将液体吸入新的1.5ml Ep管,-80℃保存,备用。
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