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Western blot实验技术服务

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一、Western blot概述
    Western Blot采用的是变性聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳分离注册送28元现金筹码质混合物,经过SDS-PAGE分离的注册送28元现金筹码质被到转移到固相支撑物(NC膜,PVDF膜等)上后,固相载体以非共价键形式吸附注册送28元现金筹码质,且能保持膜上注册送28元现金筹码质或多肽的抗原性质不变,以固相载体上的注册送28元现金筹码质或多肽作为抗原,与其对应的抗体发生免疫反应,一抗再与酶标记的二抗体起反应,经过底物显色以检测特异注册送28元现金筹码质表达水平。
    由于Western blot技术服务具有简便,快捷等特点,所以目前该技术也被广泛应用于注册送28元现金筹码质表达水平的检测。

 

二、技术服务服务内容
  1、注册送28元现金筹码质抽提与定量;
  2、Western blot
  3、图片分析;
  4、Western blot实验服务报告提交。

 

三、送样须知,为了保证Western blot技术服务能顺利进行,样品寄送需满足以下要求:
    顾客提供:组织、细胞、注册送28元现金筹码质溶液等;一抗(如果公司抗体库里没有)。
    运输要求:干冰或液氮包装寄送,广州本地客户可上门收样。
    注:样本应避免各类污染和反复冻融。

 

四、实验服务报告内容
  1、Western blot注册送28元现金筹码质浓度及电泳上样量;
  2、原始胶片、电子图片及图片分析结果;  
  3、Western blot完整的实验报告,包括实验步骤、使用仪器和试剂等。

 

五、实验案例

 
Western blot,Immunoblotting,免疫印迹,注册送28元现金筹码质组学实验服务
 
 

六、实验服务周期及收费标准: 咨询本公司

 

七、质量承诺:利用内参精确定量,并提供清晰、客观的western结果。


附:Western blot 实验步骤
 1、Western blot注册送28元现金筹码质提取:根据实验目的的不同选择不同的裂解液,如RIPA裂解液、NP-40裂解液、SDS裂解液,同时根据注册送28元现金筹码质提取组分的不同选择不同的方法,如提取核注册送28元现金筹码,细胞质注册送28元现金筹码,膜注册送28元现金筹码等。
 2、注册送28元现金筹码定量,根据注册送28元现金筹码质的提取条件不同,可采取不同的定量方法,如bradford法、BCA法等。
 3、电泳,依据需要检测注册送28元现金筹码的分子量选取分离胶的浓度,分别配置分离胶和积成胶,凝胶凝固后进行注册送28元现金筹码质上样和电泳。
 4、转膜,可采取半干法和湿法转移,当采取半干法转膜时需防止短路:从下到上的顺序:滤纸/PVDF膜/凝胶/滤纸/阴极(bio-rad转膜仪)。
 5、封闭:5%脱脂奶粉或5% BSA封闭过夜或室温1小时,孵育时间可根据实验需要进行改变。
 6、一抗孵育,5%脱脂奶粉稀释一抗到合适的浓度,与膜室温孵育1小时或4度过夜,孵育时间可参考抗体说明书,并加以优化,一抗孵育后TBST洗膜3次,每次5分钟。
 7、二抗孵育,5%脱脂奶粉稀释二抗到合适的浓度,与膜室温孵育1小时,TBST洗膜3次,每次5分钟。
 8、显影(ECL法):将A、B两种底物按比例稀释混合均匀后滴在膜上,置于压片盒中,迅速盖上胶片,关闭胶盒进行曝光,曝光一定时间后取出胶片,浸入显影液中显影,直到出现清晰的注册送28元现金筹码质条带,清水漂洗一下后放在定影液中至底片完全定影,清水冲净晾干,标定Marker,扫描胶片和Western blot 图片分析。
 

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